Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標記的重組人Annexin V來(lái)檢測細胞凋亡時(shí)出現在細胞膜表面的磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡(jiǎn)稱(chēng)PS)的一種細胞凋亡檢測試劑盒??梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光顯微鏡或其它熒光 檢測設備進(jìn)行檢測。
檢測原理
凋亡早期,細胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)會(huì )從膜內翻到膜外,這是凋亡的一個(gè)典型特征,細胞凋亡處于早期階段時(shí),僅有PS外翻,而細胞膜仍然完整,隨著(zhù)凋亡進(jìn)程的推移,細胞除了PS外翻以外,細胞膜通透性會(huì )改變,可以簡(jiǎn)單的理解成凋亡后期,細胞膜有穿孔的現象。
Annexin V凋亡檢測試劑盒一般包含3個(gè)組分:兩個(gè)染料和一個(gè)為Annexin V標記提供鈣離子環(huán)境的Binding Buffer。Annexin V本質(zhì)是一個(gè)在鈣離子環(huán)境下,能夠與磷脂酰絲氨酸高度特異性結合的膜聯(lián)蛋白,通過(guò)在該蛋白上標記的熒光基團,來(lái)標記凋亡細胞,然后再搭配只能夠進(jìn)入受損細胞膜的核酸染料,就可以達到區分各階段細胞的目的了。
細胞分為三類(lèi):一是無(wú)PS外翻,也沒(méi)有細胞膜破裂的健康細胞(兩個(gè)染料都染不上),二是處于早期凋亡,有PS外翻但是細胞膜完好的細胞(可以染上Annexin V-FITC,不能染上PI),三是處于晚期凋亡階段,既存在PS外翻,也存在細胞膜破裂的晚期凋亡細胞(兩種染料均可染上)。染完色后通過(guò)流式細胞儀,就能夠對細胞群體進(jìn)行定量和分析了。
Bioss Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒介紹
名稱(chēng) |
貨號 |
規格 |
文獻引用次數 |
Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
16篇 |
Bioss自主研發(fā)產(chǎn)品,染色效果優(yōu)于國際高價(jià)格品牌!
調亡細胞群分群清晰,且細胞群集中!
不同檢測方案,信號更強更靈敏!
操作簡(jiǎn)便,省時(shí)又省力,加入PI 后5min可直接上機檢測!
BA00101檢測數據
A. 流式細胞儀分析:
AF488最大激發(fā)波長(cháng)為488nm,最大發(fā)射波長(cháng)519nm;PI-DNA復合物的最大激發(fā)波長(cháng)為 535nm, 最大發(fā)射波長(cháng)為615nm。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制散點(diǎn)圖,AF488為橫坐標,PI為縱坐標。典型實(shí)驗中的細胞可以分成三個(gè)亞群,活細胞僅有很低強度的自發(fā)熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色及紅色熒光雙重染色。
B. 熒光顯微鏡分析:
懸浮細胞:滴一滴用 AnnexinV-AF488/PI 雙染的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞。
貼壁細胞:可直接用蓋玻片培養細胞并誘導細胞凋亡。
在熒光顯微鏡下用雙色濾光片觀(guān)察。早期凋亡細胞僅有綠色熒光信號,晚期凋亡細胞有綠色及紅色熒光雙重染色。
Annexin V單染(左)、PI單染(中)、Annexin V/PI雙染(右)
Bioss產(chǎn)品與國際品牌檢測結果對比示例
Protocol:
Jurkat 細胞生長(cháng)至對數生長(cháng)期時(shí),分別經(jīng)過(guò)紫外誘導0秒、15秒、30秒后,繼續培養4h后加入Annexin V-FITC / PI檢測。
Result:
Bioss
e品牌
k品牌
其他標記細胞凋亡檢測試劑盒 |
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產(chǎn)品貨號 |
英文名稱(chēng) |
產(chǎn)品規格 |
BA00102 |
Annexin V-AF488 Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
BA00103 |
Annexin V-AF647 Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
BA00206 |
Annexin V-eGFP Apoptosis assay Kit |
20T/50T/100T |
BA00207 |
Annexin V PE/7-AAD Apoptosis assay Kit |
20T/50T/100T |