博奧森生物,自2001年誕生以來(lái),始終堅守在生命科學(xué)前沿,為全球科研人員提供優(yōu)秀品質(zhì)的免疫學(xué)試劑產(chǎn)品與服務(wù)。經(jīng)過(guò)多年深耕,博奧森已擁有成熟的蛋白表達、抗體制備、抗體驗證、單B細胞篩選、噬菌體展示、重組抗體及工業(yè)化生產(chǎn)等平臺,為我們的抗體開(kāi)發(fā)奠定了扎實(shí)的基礎。
Bioss始終堅持“自主研發(fā)、原始創(chuàng )新”的理念。從多克隆抗體--鼠單克隆抗體—鼠重組單克隆抗體---基于單 B 細胞分選技術(shù)的重組兔單克隆抗體,Bioss以創(chuàng )新為魂,不斷地進(jìn)行技術(shù)升級與迭代。Bioss Rrmab®重組兔單克隆抗體 {R:Reliable(可靠的);r:Recombinant(重組);mab:Monoclonal antibodies (單克隆抗體)},為廣大科研工作者提供更多高品質(zhì)、可靠的抗體產(chǎn)品。單B細胞的單克隆抗體發(fā)現平臺
與傳統雜交瘤技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺相比,Bioss搭建的單B細胞的單克隆抗體發(fā)現平臺主要是依托于Bioss多年的抗體開(kāi)發(fā)以及豐富的抗體標記經(jīng)驗,利用細胞分選技術(shù)從免疫的動(dòng)物中分離外周血單核細胞 (PBMCs) 從而獲得抗原特異性的單個(gè)B細胞,利用分子生物學(xué)技術(shù)從抗原特異性的B細胞中獲得抗體序列信息,經(jīng)體外重組表達、篩選,獲得滿(mǎn)足不同應用需求的基因工程重組兔單克隆抗體。Rrmab®重組兔單克隆抗體的優(yōu)勢
單克隆抗體與多克隆抗體比較,在特異性和性能穩定性上優(yōu)勢明顯;由于兔子具有特別的免疫系統,相比其他物種來(lái)源的抗體而言,兔源重組單克隆抗體有以下一些優(yōu)勢:①較高的親和力、較高的檢測靈敏度、較高的特異性和較高的穩定性;
②抗體的多樣化可識別更多的表位及稀有抗原,如磷酸化抗原、碳水化合物等;特別是對于一些難開(kāi)發(fā)的翻譯后修飾位點(diǎn)特異性抗體、小分子化合物抗體、核苷酸 (DNA/RNA) 抗體、多糖類(lèi)抗體具有很大優(yōu)勢;
③抗體結構簡(jiǎn)單,兔IgG僅有一種亞型,更易于人源化改造;
④重組技術(shù)可提高抗體生產(chǎn)的批次間一致性;
⑤可做到無(wú)動(dòng)物源成分,滿(mǎn)足如抗體藥物等的生產(chǎn)需求。
Rrmab®重組兔單克隆抗體的開(kāi)發(fā)流程
3 抗體的驗證
將分選的單個(gè)B細胞先在體外進(jìn)行5~20板96孔板單B細胞培養,然后將細胞培養的上清進(jìn)行ELISA、WB、FCM等實(shí)驗的驗證篩選。
敲除驗證(KO驗證)是驗證抗體的所有方法中可接受性和可信度比較高的
4 陽(yáng)性克隆測序與表達
挑選驗證數據優(yōu)異的陽(yáng)性細胞克隆進(jìn)行RT-PCR,來(lái)擴增其抗體可變區基因,然后進(jìn)行測序。最后進(jìn)行抗體的表達載體構建、抗體的表達。得到重組兔單抗。