技術(shù)介紹

       CRISPR/Cas9 是一種基于細菌天然免疫機制開(kāi)發(fā)出來(lái)的基因編輯技術(shù)，用于抵御病毒等外來(lái)物入侵的一種防御機制。經(jīng)改造的CRISPR系統主要由Cas9蛋白和單鏈向導RNA（sgRNA）組成，其中sgRNA對靶序列進(jìn)行特異性識別，Cas9蛋白負責對識別的靶序列進(jìn)行切割，從而實(shí)現DNA的雙鏈斷裂。

KO 細胞系的應用

基因功能研究      

      由于模式生物基因組測序系統的逐漸完善，使CRISPR/Cas9技術(shù)在基因組中同時(shí)進(jìn)行多靶位點(diǎn)的編輯成為可能。研究表明將缺失突變引入不同基因的編碼外顯子中，可以在人細胞中當做強大的陰性和陽(yáng)性篩選對照。與先前的 RNAi 技術(shù)的脫靶嚴重、編輯效率低及僅限于轉錄過(guò)程相比，CRISPR/Cas9技術(shù)介導的篩選可更好的實(shí)現專(zhuān)一性和敏感性，設計的sgRNA可以靶向任何 DNA 序列。RNAi 方法只導致基因表達抑制，而CRISPR/Cas9技術(shù)產(chǎn)生的Indels可以致使基因功能喪失，比RNAi 出現更加明顯的表型，這更容易鑒定目的基因。

藥物靶點(diǎn)的確定      

      利用CRISPR-Cas9技術(shù)建立基因缺失病變的KO細胞模型，有助于研究疾病的發(fā)病機制和篩選潛在的藥物靶點(diǎn)，并通過(guò)高通量藥物反應數據，初步篩選出在特定藥物處理下細胞存活率變化顯著(zhù)的細胞系，進(jìn)而評估藥物對特定基因敲除細胞的影響，從而篩選出有效的藥物候選物。從基因的功能研究到藥物靶點(diǎn)的篩選，再到藥物效果的評估及驗證，KO細胞系提供了一個(gè)強有力的實(shí)驗平臺，加速了新藥的研發(fā)進(jìn)程。同時(shí)，KO細胞系不僅在細胞層面上有所應用，還可以用于構建動(dòng)物模型，進(jìn)一步研究藥物在體內的作用機制和治療效果，尤其是在遺傳性疾病的治療研究中發(fā)揮著(zhù)巨大作用。

抗體的特異性鑒定      

      抗體是生命科學(xué)研究中的常用試劑之一，抗體的特異性對研究者們至關(guān)重要?？贵w的特異性是指抗體能夠識別并結合到其目標抗原的能力，而不與其他非目標分子發(fā)生交叉反應。特異性抗體可以減少實(shí)驗中的誤差，降低了非目標分子的干擾，有助于提高實(shí)驗的可重復性，使實(shí)驗結果更加可靠。      

      目前，基因敲除驗證（KO）是廣受信任且接受度最為廣泛的抗體特異性驗證方法之一。利用CRISPR-Cas9技術(shù)，構建目的基因缺失的KO細胞系。如果抗體是特異性的，那么不應該檢測到信號，而在野生型（WT）細胞系中則應該檢測到特異性靶蛋白的信號。KO細胞系提供了真正意義上的陰性對照，一度被稱(chēng)為“抗體特異性驗證的金標準”，以確認抗體對目標蛋白的特異性。

PART.1 隆重推出 KO 系列產(chǎn)品

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KO驗證的特異性抗體

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PART.2 CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)服務(wù)

服務(wù)編號：SV1501

一、服務(wù)內容與流程

服務(wù)內容:

 服務(wù)流程：

1.客戶(hù)提供需要敲除的指標信息，與公司商定具體的制備項目、數量和費用，雙方簽訂《委托CRISPR/Cas9基因敲除服務(wù)合同》。

2.雙方確定合作細節，實(shí)驗過(guò)程中及時(shí)反饋實(shí)驗進(jìn)程，并按照規定時(shí)間完成委托服務(wù)。并向客戶(hù)提供委托產(chǎn)品與實(shí)驗報告。

二、技術(shù)流程

1.RNP轉染法

2.質(zhì)粒轉染法

三、案例結果展示

四、服務(wù)優(yōu)勢

1.兩種敲除方法（質(zhì)粒法和RNP法）可供客戶(hù)選擇。

2.每個(gè)靶標設計多條sgRNA，提供多種敲除策略，最大限度的提高的KO效率，提高蛋白水平的敲除概率。

3.通過(guò)Sanger測序后，多種軟件分析編輯效率，提高編輯結果的準確性。

4.不同的細胞系具有專(zhuān)屬的轉染方案，提高靶標編輯的效率。